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植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒

简要描述:植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒
规格:96T/48T
货号:BLL105654E
检测范围:1.25-40ug/mL
上海佰利莱生物主营elisa试剂盒,抗体,细胞等产品

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-07-15
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详情介绍

植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒试验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中调亡蛋白酶因子1(Apaf-1)水平。用纯化的调亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入调亡蛋白酶因子1(Apaf-1),再与HRP标记的调亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的调亡蛋白酶因子1(Apaf-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中调亡蛋白酶因子1(Apaf-1)浓度。

植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒
自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。
植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒

操作注意事项:

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂,应包装好或盖好,不同批号的试剂不要混用,保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A易挥发,避免长时间打开盖子,底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒,实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤:

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
植物高分子量清蛋白(HMW-alb)elisa试剂盒

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